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海棠顶芽外植体生长与分化的诱导
通过海棠顶芽和腋芽的发育进行再生的，为促进侧芽分化生长，常在培养基中添加o．1-10血B／L的细胞分裂家及少量生长素(o．ol-o．5m8儿)或o．05-1m8儿的赤霉亲。诱导外植体产生不定芽的所用激素与上述相同，其中生长素浓度应低于细胞分裂素。诱导胚状体的发育，一部分海棠植物种类在培养初期，要求必须含适量生长素类物质，多用2，4-滴，以诱导脱分化、愈伤组织生长和胚性细胞形成，后期则必须降低或完全去掉2，4-滴才能完成胚状体的发育，另一部分海棠植物则在只含细胞分裂素的培养基上可诱导胚状体，如檀香、红醋栗、山岭麻黄等；大多数海棠植物在生长累和细胞分裂家同时添加的培养基上可诱导出胚状体，海棠原球茎的诱导比较容易，只需基本培养基或稍稍提高NAA浓度o．1一o．2m8儿即可。
诱导的海棠环境条件依培养对象的种类而有所不同。一般要求在23-26℃的恒温，每天12-16小时，1000一3000lx的光照条件下进行培养，另外，培养室要求清洁卫生，以减少污染。
(且)中间繁殖体的继代培养
将在第二阶段诱导出的芽、胚状体、原球茎等称为中间繁殖体。将中间繁殖体在人为控制的最好的营养供应、激素配比和海棠环境条件下进行进一步的培养增殖，即转接继代。具体做法是配制适宜继代的培养基，将中间繁殖体不断接种其上，在培养室继续培养。注意继代工作必须及时，否则中间繁殖体的老化会影响其进一步增殖。
(四)海棠生根与壮苗培养
在中间繁殖体增殖到一定数量后，即开始进行海棠生根与壮苗的培养。将最后一次继代培养的中间繁殖体未发黄老化或出现拥挤前，及时海棠转移至海棠生根培养基上，海棠转移的同时进行苗丛、胚状体或原球茎的分离。较低的矿物元素浓度、较低的细胞分裂素含量及较多的生长富有利于海棠生根，放此时一腋采用1／2或1／4的Ms培养基，全部去除细胞分裂素或减少至极少量，加入适量萦乙酸的方法。对于容易海棠生根的种类可直接在培养室外进行墩茎的扦插。
